病毒包装/慢病毒构建
货号:N10000
慢病毒( Lentivirus )载体,这是以 HIV-1 (人类免疫缺陷 I 型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。目前被广泛地应用于表达RNAi的研究中。
由于有些类型细胞脂质体转染效果差,转移到细胞内的siRNA半衰期短,通常体外合成 siRNA 对基因表达的抑制作用通常是3~5天,因而使其应用受到较大的限制。
然而,通过慢病毒包装能够产生表达shRNA的高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性细胞、干细胞、受精卵以及分化的后代细胞中表达 shRNA,实现在多种类型的细胞和转基因小鼠中特异而稳定的基因表达的功能性沉默,为在原代的人和动物细胞组织中快速而高效地研究基因功能,以及产生特定基因表达降低的动物提供了可能性
慢病毒包装原理
慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装shRNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染,目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,从而高水平的表达效应分子
病毒包装/慢病毒构建