蛋白表达质粒的接合转移方法
发布日期:2021-12-18 浏览次数:792
表达载体是指具有宿主细胞基因表达所需调控元件,能使克隆的基因在宿主细胞内转录与翻译的载体。也就是说,克隆载体只是携带外源基因,使其在宿主细胞内扩增;表达载体不仅使外源基因扩增,还使其表达。外源基因在受体细胞内表达与否及表达水平受到许多因素(调控元件)的制约。
各种表达系统各有其优缺点,大肠杆菌和酵母表达系统蛋白表达水平高,生产成本低,但它们的加工修饰体系与昆虫细胞、哺乳动物细胞不*相同;哺乳动物细胞产生的蛋白质更接近于天然蛋白质,但其表达量低、操作繁琐。
各种表达系统由于翻译后的加工不*相同,因而产生的重组蛋白的生物学活性和免疫原性有时会有差别。因此,选择表达系统时,必须充分考虑各种因素,如所需要表达的蛋白是否有毒性,是否有活性,是否需要糖基化,还需要考虑成本、产量及纯化路线和安全性。
蛋白表达质粒的接合转移方法:是细菌遗传物质转移的一个重要方式。在质粒转移过程中,供体菌和受体菌通过结合作用紧密接触,质粒从供体细胞向受体转移,同时进行质粒复制。按能否自主转移,可以将天然存在的质粒分为转移型质粒和非转移型质粒两大类。这里要注意的是,获得质粒的细菌可随之而获得一些生物学特性,如耐药性或产生细菌素的能力等。从环境友好出发,实验室里的废弃菌液,一定要灭过菌才能倒哦。